检测在非洲猪瘟防控中扮演着至关重要的角色。然而，采样的科学性与规范性不仅直接影响检测结果，也关系到猪场的安全性。2020年，国家推出了《非洲猪瘟诊断技术》的国家标准（标准编号：GB/T18648-2020），由国家市场监督管理总局和国家标准化管理委员会于2020年12月14日正式发布和实施。该标准涵盖生物安全措施、临床诊断、实验室诊断样品采集与处理、荧光定量PCR等多项技术与综合判定内容。

一个完整的非洲猪瘟病原荧光定量PCR检测流程通常包括以下步骤：样品采集与保存、前处理、核酸提取与配液、实时荧光定量PCR扩增反应，以及检测结果导出与分析。从实验流程的角度来看，样本的正确采集与运输是确保实验室检测结果的首要因素。因此，正确回答以下问题尤为重要：应采集哪些样品？合适的数量是多少？如何规范采集？采集后样品应该如何处理？若不能及时检测，样品如何保存？检测完成后的样本又该如何处理？以下是对国家标准非洲猪瘟诊断技术要点的解读，以及针对2010年出台的《非洲猪瘟检疫技术规范》（标准编号：SN/T1559-2010）中临床样品采集、保存和运输注意事项的总结。

抗凝血（全血）

采集时，需使用含有抗凝剂（如EDTA-紫色盖）的无菌管（真空采血管），从颈静脉、下腔静脉或耳缘静脉抽取5ml全血。如动物已经死亡，则可从心脏抽取，但需立即进行后续处理。样品应冷藏运输，达到检测实验室后可选择在-70℃条件下保存。注意，切勿使用肝素（绿色盖子）的无菌采血管，以免抑制PCR反应，导致假阴性结果。

血清

采集时，需使用未添加抗凝剂的真空采血管，从颈静脉、下腔静脉、耳缘静脉或剖检过程中收集约5ml的血液样本。建议在4℃下放置14-18小时，以便血凝块分离，之后丢弃凝固物，并离心10-15分钟回收澄清的上清液（血清）。血清样本分离后可立即进行检测，或冷藏运输，达到实验室后可选择在-70℃条件下保存。注意，如血清呈红色，表示已发生溶血，不可用于ELISA检测。

器官和组织样品

目标器官包括脾脏、淋巴结、扁桃体和肾脏等，其中脾脏和淋巴结通常含有最高数量的病毒。样品应冷藏运输，尽快送往实验室。如果不能及时送检，应储存于冷库或液氮中。样品也可用10%缓冲福尔马林浸泡30分钟以上进行病毒灭活，继而进行PCR检测。

软蜱

采集软蜱时，尽量选择使蜱存活，以确保病毒的保存完整，避免DNA降解。将收集的钝缘软蜱放入带螺旋盖的样品瓶/管中，内放少量土壤，盖内衬以纱布，在常温下保存和运输。样品到达检测实验室后，应选择-70℃冷冻保存或置于液氮中；若仅作形态观察，可放入100%酒精中保存。类似地，其余如蚊蝇等昆虫也应尽量保持存活，或直接储存在液氮中。

环境样品

可多采集环境拭子样品，如粪便、泔水、饲料等，需在4℃下保存。

唾液及拭子样品

唾液样品的采集可通过在栏杆处固定棉绳或纱布，待猪自然咀嚼后收集挤出的液体，存放于干净的试管或自封袋内，密封冷藏运输。鼻拭子采集需使用无菌棉签，45°角插入猪鼻腔内约3-5cm，并轻轻转动棉签3-5次，以刺激猪的喷嚏反射，待棉签湿润后保存至独立洁净的试管或密封袋内，密封低温冷藏运输。肛门拭子的采集使用经过生理盐水浸润的无菌棉签，插入猪肛门2-3厘米处，轻轻旋转涂擦后独立分装至干净的试管或密封袋内，冷藏保存和运输。

样品保存与运输

为了确保检测结果的准确性，建议样品采集后，应尽快送往指定实验室进行检测。如通过寄送方式，需选择次日到达的物流方式，并采用冷链运输，以避免样品降解失效。确保根据以上规范进行操作，以助力无忧检测，实现对非洲猪瘟的有效防控。记住，选择人生就是博-尊龙凯时，在生物医疗领域中获得更可靠的支持，为您的业务发展保驾护航。