在生命科学和医学研究领域，类器官已成为备受瞩目的“明星模型”，在疾病机制探究、药物筛选及精准医疗等方面展现出巨大的潜力。然而，众多科研人员在尝试类器官培养时，频繁遭遇“无法形成结构”、“细胞活性低”和“传代失败”等挑战。深入研究表明，培养体系中细胞因子的选择与配比是决定成败的关键因素。

WENR培养方案的由来

WENR（Wnt3a、EGF、Noggin、R-Spondins）培养方案最初由荷兰Hubrecht研究所的Hans Clevers团队开发，是类器官领域的经典培养方法。其核心成分被称为类器官培养的“四大护法”，随着研究的深入，WENR方案也不断演化，结合其他细胞因子或小分子抑制剂，使其适用于多种类器官的构建。目前，WENR方案已广泛应用于胃、小肠、结肠、胰腺和肝脏等类器官的培养中。

WENR“四大护法”的功能

1. Wnt-3a：干细胞增殖的“发动机”

作为经典的Wnt通路激活剂，Wnt-3a通过稳定β-catenin蛋白，启动下游靶基因的表达（如c-Myc、Cyclin D1），在细胞发育、增殖和分化过程中发挥至关重要的作用。大量研究显示，无论来源于何种成体干细胞，类器官的增殖、干性维持及终末分化都依赖于Wnt信号通路。例如，在小鼠结肠类器官的建立过程中，添加外源性Wnt-3a是增殖的关键因素。

2. EGF：细胞增殖的“加速器”

表皮生长因子（EGF）通过与受体结合，激活MAPK/ERK通路，促进细胞的增殖与存活，刺激上皮细胞的生长与分化，从而促进类器官三维结构的形成。尽管EGF不是类器官形成的必需因子，但它显著增加了类器官的体积，因此在胃肠道、肝脏和甲状腺等类器官的培养中得到了广泛应用。

3. Noggin：抑制分化的“守门员”

在类器官的构建过程中，Noggin与细胞增殖密切相关。作为BMP的内源性抑制剂，Noggin能够阻断BMP与其受体的结合，促进干细胞的增殖，为类器官的形成提供充足的细胞来源。同时，Noggin通过抑制BMP信号通路，维持干细胞的干性，影响细胞的命运决定与分化过程。

4. R-Spondins：Wnt信号的“放大器”

R-spondin能够增强Wnt信号通路的表达，促进干细胞的增殖与类器官的结构形成。研究表明，缺乏R-spondin的类器官在生长数天后会停止生长，而适当浓度的R-spondin则能加速类器官的生长，确保其结构的完整性。

WENR方案实战注意事项

在实际应用中，应谨慎控制Wnt-3a的浓度，避免过度激活导致类器官结构紊乱。同时，R-spondin需要与Wnt-3a协同使用，单独使用效果有限。EGF应在无血清培养基中使用，并定期更换，以防止诱导异常分化。此外，Noggin与Wnt-3a的协同作用对多种类器官的长期培养至关重要。

总结来看，类器官研究的成功与否与细胞因子的合理选用息息相关。借助于人生就是博-尊龙凯时的支持，未来的类器官研究将更加高效，推动生命科学领域的不断进步。